Взаимосвязь диффузных колоний фибробластов кожи с клеточным старением и пролиферацией клеток

Для разработки персонифицированного подхода к восстановлению кожи (как в дерматологии, так и косметологии) может быть использован простой и точный способ оценки доли стареющих фибробластов кожи, утративших способность к пролиферации (делению). В настоящем исследовании изучена корреляция между долей стареющих клеток в первичной культуре фибробластов кожи человека и типами колоний, образованных клетками-предшественниками фибробластов, с помощью простого и широко распространенного метода - клонального анализа. Мы определили долю клеток, положительных по ферменту β-галактозидазе, ассоциированному с клеточным старением [senescenceassociated β-galactosidase (SA-βgal)] как в гетерогенных культурах, так и в колониях различного морфологического типа (плотных, смешанных и диффузных), образованных клетками-предшественниками фибробластов кожи от 10 здоровых доноров. Выяснилось, что несмотря на то, что доноры были, практически, одной возрастной группы (33-54 года), эффективность колониеобразования фибробластов (ЭКОф) и процентное соотношение плотных, смешанных и диффузных колоний среди этих доноров сильно варьировали. Нами впервые показано, что доля SA-βgal-положительных клеток была самой большой в диффузных колониях, что подтверждает тот факт, что эти колонии произошли от клеток-предшественников с наименьшей пролиферативной способностью. Была также выявлена корреляция между процентом диффузных колоний и количеством SA-βgal-положительных клеток в гетерогенной  культуре. Используя Ki67 в качестве маркера клеточной пролиферации, мы выявили наличие выраженной обратной корреляции (r=-0.85, p=0.02) между процентом диффузных колоний и долей клеток с фенотипом Ki67+. Более того, была обнаружена существенная обратная корреляция (r=-0.94, p=0.0001) между процентом диффузных колоний и ЭКОф. Полученные нами данные свидетельствуют о том, что количественное определение доли диффузных колоний может быть простым и полезным способом оценки степени клеточного старения в популяции фибробластов кожи человека.

Взаимосвязь диффузных колоний фибробластов кожи с клеточным старением и пролиферацией клеток
AGING 2017, Vol. 9, No. 5